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兽药项目
禽血液样品的采集与保存方法

随着我国养鸡业规模化、集约化进度的加快,鸡病也呈现出新的特点,如混合感染增多,病症复杂化和非典型化。疫苗免疫在重大动物疫病防控中起着举足轻重的作用,而在免疫效果监测和辅助疫病诊断中,血液样品的采集方法、数量和质量直接决定着监测结果的准确性和监测结论的科学性,准确快速的采血技术还可以减少鸡只应激,避免造成鸡只不必要的死亡。血样的采集看似简单,但真正操作起来,其难度和强度较大,集专业知识和操作技巧于一体。现就血液样品的采集、血清的分离、运输及储存做如下简要说明。

1、采样数量

每栋鸡舍按千分之三采样量,但不能低于10份血样。

2、采血方法

临床上常用的方法有翅静脉采血、颈静脉采血和心脏采血。

2.1 雏鸡采血

雏鸡多采用心脏采血 左手抓鸡 ,右手持采血针,平行颈椎从胸腔前口插入,回抽。有血液回流时,将针芯向外拉,使血液流入针管。

颈静脉采血 采血者左手食指和中指夹住鸡头部,并使头部偏向一侧,拇指按压颈椎使颈静脉怒张,手掌和其他手指保定住鸡只。右手持注射器,将针头沿血管方向以45°的角刺入颈部皮肤及血管,在与血管平行进针0.2~0.5 cm抽取血液,采血完毕后用干棉球按压采血部位并退出针头,防止出血。

2.2 青年鸡和成年鸡的采血

翅静脉采血:采血者左手拨开翅内侧羽毛,在翅下静脉处消毒,右手持注射器与皮肤呈45°方向顺着血管进针,见有血液回流即把针芯缓慢外拉,使血液流入针管,每只鸡采血液1~2ml做好标记。

翼根采血:侧卧保定禽只,展开翅膀 ,露出腋窝处,拔掉羽毛,用酒精棉球消毒。拇指按压近心端,待血管怒张后,用5mL一次性注射器,由翼根向翅方向平行刺入静脉,放松对近心端的按压,外拉针芯,缓慢抽取血液。

心脏采血:此方法多用于血液需要量较多时。将鸡仰卧保定,针头从V型锁骨前端刺入,或者在靠近心脏的胸侧壁刺入;心脏采血过程中,如果操作不慎,易损伤肺脏,更有慎者,引起大出血死亡。

3、血清的分离

用注射器采集血液后,拔掉针头,注入1.5毫升EP管中,一般血液在室温下(18℃~25℃)放置2~4小时,血清会自然析出,将EP管放在25~37℃温箱内lh或置于4℃冰箱内过夜,必要时用离心机以l500~2000r/min离心5min,分离血清。在一次性注射器中自然析出血清时,注射器中应吸入1~2mL空气,待大部分血清析出后,将血清移至EP管中,盖上管盖,用记号笔做好标记。

注意:血清颜色呈浅黄色、半透明较好,尽量避免溶血;胶冻状血清的成因:采血前刚喂食(没有空腹);凝血时间不够;脂肪血(营养过剩)。

4、血清的保存与运送

4.1血清样品的保存

通常分离到的血清样品保存于EP管中,存放于4℃冰箱内或冷冻。

4.2血清样品送检流程

如果样品能在24小时内送达检测中心,可于4℃保存,如果24小时内不能送达检测中心,样品必须冷冻处理后,严格包装,冷链运输(密闭封装并加冰袋运送)。同时要填写详细的样品记录。

注意:包装发货前,请检查EP管管盖是否扣紧,以防运输途中样品遗漏。

5、血清的解冻

血清不宜反复冻融。反复冻融会使血清中的脂蛋白和纤维蛋白变性,导致出现絮状沉淀物,影响检测结果的客观准确性。